CHA 對白細胞介素 (IL)-4 誘導的巨噬細胞標志物表達的影響

研究背景

1、膠質(zhì)母細胞瘤（GBM）是一種極具侵襲性的腦腫瘤，預后極差，患者生存期通常不超過15個月，即使經(jīng)過手術切除和常規(guī)的化療、放療，效果也不理想。

2、GBM的免疫微環(huán)境在其進展和轉(zhuǎn)移中起著關鍵作用，特別是小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞的浸潤。如何通過調(diào)節(jié)巨噬細胞的極化狀態(tài)來抑制腫瘤生長是一個重要的研究難點。

3、現(xiàn)有研究表明，綠原酸（CHA）在多種惡性腫瘤中具有抗腫瘤效應，但其具體機制尚不明確，特別是在調(diào)節(jié)巨噬細胞極化方面的作用。

研究方法

1、體外實驗：使用LPS/IFNγ和IL-4分別誘導M1和M2巨噬細胞極化，檢測CHA對其極化狀態(tài)的影響。通過RT-PCR分析M1和M2標記基因的表達變化，使用流式細胞術檢測細胞表面標志物的表達。

2、體內(nèi)實驗：在G422膠質(zhì)瘤異種移植小鼠模型中，評估CHA對腫瘤生長的抑制作用，并通過流式細胞術和免疫熒光染色分析腫瘤組織中M1和M2巨噬細胞的分布。

實驗設計

1、在體外實驗中，CHA處理顯著增加了LPS/IFNγ誘導的M1標記基因（如iNOS、MHC II和CD11c）的表達，并減少了IL-4誘導的M2標記基因（如Arg1和CD206）的表達。具體來說，CHA在1 μM濃度下顯著增加了Ana-1細胞中iNOS mRNA水平，并減少了Arg1 mRNA水平（P ≤ 0.05）。

2、在體內(nèi)實驗中，CHA處理的小鼠腫瘤重量顯著減少，腫瘤抑制率在20 mg/kg和40 mg/kg劑量組分別為30%和48%（P ≤ 0.05）。CHA處理的小鼠腫瘤組織中CD11c+ M1巨噬細胞比例增加，而CD206+ M2巨噬細胞比例減少。

結果與分析

1、CHA通過促進STAT1信號通路激活和抑制STAT6信號通路激活來調(diào)節(jié)巨噬細胞的極化狀態(tài)。具體來說，CHA顯著增加了p(Tyr701)-STAT1和p(Ser727)-STAT1的表達，并減少了p(Tyr641)-STAT6的表達（P ≤ 0.05）。

2、在共培養(yǎng)實驗中，CHA顯著抑制了M2巨噬細胞對腫瘤細胞的促增殖作用，并增強了M1巨噬細胞的抗腫瘤效應。CHA處理后，U87膠質(zhì)瘤細胞的形態(tài)變?yōu)榈蛲鰳訄A形。

總體結論

1、CHA通過抑制M2極化和促進M1極化，調(diào)節(jié)巨噬細胞的極化狀態(tài)，從而抑制膠質(zhì)母細胞瘤的生長。具體機制包括促進STAT1信號通路激活和抑制STAT6信號通路激活。

2、這篇論文首次展示了CHA通過調(diào)節(jié)巨噬細胞極化來抑制膠質(zhì)母細胞瘤的生長，提供了新的治療思路和方法。

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